在生物医药行业中，动物实验广泛应用于新药研发、疾病研究和基础研究。实验动物模型在新药的研发过程中具有重要作用，能够模拟人类疾病，降低风险，提高效率，确保药物的安全性和有效性。近岸蛋白提供神经疾病研究及皮肤炎症领域造模所需的热门重组蛋白，目前已服务海内外数十家客户。动物造模蛋白产品覆盖多发性硬化症(multiple sclerosis，MS) 、帕金森疾病(Parkinson disease，PD)等神经疾病模型，以及银屑病(Psoriasis) 、特异性皮炎(atopic dermatitis，AD) 等皮肤炎症模型。

　　多发性硬化症-EAE模型

　　多发性硬化症是一种中枢神经系统慢性炎症性疾病，其主要病理改变为中枢神经系统（CNS）白质脱髓鞘，最终会导致神经元死亡。研究者认为，不仅髓鞘特异性 CD4+T 细胞攻击中枢神经系统髓鞘介导了 MS 的发生，而且 B 细胞作为抗原递呈细胞（APCs）、产生促炎细胞因子和趋化因子以及分泌针对髓鞘和轴突的自身抗体也都起着重要作用[1]。CD20 单抗 Ofatumumab 已于 2020 年和 2021 年分别获得美国 FDA 和欧盟的批准，它通过结合 B 细胞表面的 CD20 分子并诱导有效的 B 细胞溶解和耗尽而发挥作用，用于治疗成人复发性多发性硬化症，展现出针对 B 细胞相关靶点，尤其是 B 细胞耗竭疗法在 MS 治疗中的巨大潜力。实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE) 模型是多发性硬化症的常用动物模型。这个模型通过引起小鼠或者大鼠免疫系统攻击其自身神经组织而导致神经损伤和症状。

　　近岸蛋白自主研发重组人MOG1-125蛋白，纯度＞95%，不仅被国内头部药企和CRO公司广泛选用，适用于各种模式动物EAE疾病建模，尤其是针对B细胞相关靶点的模型研究。

　　MOG(MOG1-125)参考免疫策略

　　在诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）时，将100μg MOG 1-125通过超声乳化的方式混入添加了5mg/mL的结核分枝杆菌的不完全弗氏佐剂中。小鼠在第0天接受皮下注射该乳化剂，并且在第0天和第2天接受腹腔注射300ng的百日咳毒素。每2天检测一次临床评分和体重，直至出现症状，之后则改为每日检测[2]。

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　　帕金森疾病模型-PD模型

　　帕金森病是最常见的神经退行性疾病之一，其主要病理变化是黑质致密部中多巴胺能神经元进行性丢失且伴有α-突触核蛋白 (alpha-Synuclein，SNCA)为主要成分的路易小体的形成。相比于使用神经毒素（如6-OHDA和MPTP）杀伤多巴胺神经元的帕金森模型，基于alpha-Synuclein的帕金森病模型由于在时程上能够较好地模拟帕金森病发生、发展的全过程，这有利于发现和识别新的治疗靶点。

　　近岸蛋白提供超低内毒素(<0.05 EU/mg),纯度＞95%的alpha-Synuclein蛋白，用于帕金森疾病建模。该alpha-Synuclein单体可在体外制备预制纤维（PFFs），通过脑立体定位注射的方式将PFFs注射进脑内，可诱发内源alpha-Synuclein的聚集、磷酸化和泛素化反应，适用于驱动路易小体形成和扩散的药物机制研究，以及适用于阻断该过程化合物的筛选和有效性验证。

　　alpha-Synuclein参考免疫策略

　　重组人alpha-Synuclein按照已发表的方案被制成纤维状[3]，并制备成预成型纤维（PFFs）以便用于体内给药。alpha-Synuclein PFF和单体溶液的最终浓度为2μg/μL。采用无菌技术，用异氟烷对动物进行麻醉并为立体定向手术做准备。当分两次给药共注入10μg PFFs，以0.5μL/min的速度在AP +0.3、ML +2.2mm、DV -3.0mm及 -4.0mm处注入2.5μL体积中含5μg PFFs的溶液[4]。

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　　银屑病模型-Psoriasis模型

　　银屑病是一种常见的慢性炎症性疾病，临床表现为红斑、斑块、鳞屑的慢性炎症性皮肤病。在各种细胞因子注射小鼠模型中，注射IL-23是最为常见的建模方式[5]。小鼠耳廓皮内注射IL-23可通过IL-23/Th17轴诱发炎症。IL-23激活下游反应诱导分化Th17细胞，分泌的IL-17和IL-22作用于角质形成细胞等引起皮肤细胞的炎症损伤。目前，细胞因子模型诱导银屑病易使用、能够与其他各种基因工程小鼠模型联合使用、建模时间较短，靶点通路明确等优点。向小鼠皮肤注射IL-23、IL-12、IL-36、IL-22和IL-33已被应用于诱导银屑病样皮肤炎症。

　　近岸蛋白不仅提供IL-23细胞因子用于银屑病造模。IL-33和IL-36等细胞因子也被用于皮肤炎症建模，助力靶向皮肤炎症的药物开发。

　　IL-23参考免疫策略(耳部）

　　使用无菌PBS将rIL-23储备液稀释至工作浓度为25ng/μL，每只小鼠每次注射需要20μL。麻醉小鼠后，将30号针头从根部弯曲90度，然后将针头插入耳部，尽量以较浅的角度使针头斜面朝上，以便将溶液注射到真皮层。每隔一天进行一次耳部厚度测量和皮内注射，计算注射rIL-23耳朵相对于第一天耳部厚度的变化。在每次注射rIL-23之前，应对每只处于麻醉状态的小鼠进行一次耳部厚度测量[6]。

　　IL-23参考免疫策略(背部）

　　小鼠麻醉后，使用电动推剪或脱毛膏将小鼠背部毛发剃除。三天后进行rIL-23的注射。为此，首先将小鼠rIL-23储备液在无菌PBS中稀释至工作浓度为25ng/μL，每次注射需要20μL，每只小鼠注射2次。将30号针头从根部弯曲 90 度，然后将针头以尽可能浅的角度，斜面朝上插入皮肤，以便将溶液注入真皮层。以缓慢、连续的动作在背部两侧的两个部位分别注射 20μL含 500 ng rIL-23 的溶液或 20 μL PBS 对照溶液（每只小鼠总计 1 μg）每天进行皮内注射，一般第四天会出现银屑病样变化，第五天开始炎症会有所减轻[6]。

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　　除造模蛋白外，近岸蛋白同时提供实验所需的IgG1/4同型对照及180+阳参抗体，还可提供技术支持和模型构建相关重组蛋白定制服务，欢迎咨询！

　　相关产品：IgG1/4同型对照抗体

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