外泌体简介

外泌体(Exosome)是细胞主动分泌的纳米级(30–150nm)细胞外囊泡，广泛存在于血液、尿液、唾液、乳汁等体液中。其脂质双层膜内包裹着蛋白质、脂质、RNA及DNA等多种活性分子，是细胞间通讯的关键媒介。凭借独特的生物活性、靶向传递能力及低免疫原性优势，外泌体已突破基础研究边界，在医疗诊断、药物递送、再生医学及医美等多个领域，展现出广阔的应用前景与实用价值。

外泌体储运瓶颈与冻干技术破局

外泌体应用前景广阔，但稳定性差的问题成为其产业化落地的核心阻碍，瓶颈集中在储存与运输环节。外泌体的磷脂双分子层结构对环境极度敏感，其生物活性高度依赖稳定低温环境，常规需储存于-80℃条件下，即便如此，长期保存仍伴随活性逐步衰减，反复冻融更会诱发外泌体聚集、膜结构破裂及内容物泄漏。此外，长周期（883436）全程冷链不仅操作繁琐，还大幅增加综合物流和仓储成本。

真空冷冻干燥技术(Lyophilization)为这一困境提供了核心解决方案。该技术通过先将物料冻结为固态，再在真空环境下使水分由固态冰直接升华为水蒸气，实现低温脱水干燥。应用于外泌体处理时，可在深度冷冻条件下完成溶液脱水，最大限度锁定外泌体的膜结构完整性与内容物活性，实现常温下的长期储存与运输。

因此核心问题解决办法聚焦外泌体冻干工艺技术。应如何进行高效外泌体冻干，冻干保护剂成分配比如何设定，降温速率、真空度、复水条件等工艺参数经等如何设计？如何进行冻干效果评价及技术工艺的验证？--东富龙（300171）提供定制化技术方案。

东富龙间充质外泌体收获及冻干解决方案

针对外泌体产业化过程中的产能限制、纯度局限性及储运稳定性等核心痛点，东富龙（300171）构建了从外泌体收获到冻干的全流程工艺解决方案，提供从试剂、耗材、设备及工艺为一体的产业化方案，具体工艺优势如下：

图1. 间充质外泌体收获及冻干工艺流程

高效培养工艺

采用东富龙（300171）生物试剂（无血清培养基、水溶性微载体等）搭配玻璃式生物反应器，通过精准优化动态培养关键参数，实现MSC的3D规模培养，打破传统静态培养的效率瓶颈，不仅实现细胞的高数量收获，也实现一批次培养多次外泌体原液的收获。

高纯级品质与高收率保障

针对外泌体纯化环节的核心痛点，操作复杂、回收率低、处理载量受限等，东富龙（300171）构建了“澄清过滤除杂—高通（QCOM）量切向流超滤浓缩—复合模式层析纯化”的三步递进纯化策略，不仅适用于实验室级别的小规模研究，也可实现大规模生产。这套方案可使最终外泌体回收率稳定在85%以上，兼顾纯度与收率双重优势。

外泌体专用冻干试剂与精准冻干曲线协同方案

为进一步强化外泌体储运稳定性，东富龙（300171）构建了外泌体无血清冻干保护剂（ML1001-100）与精准冻干曲线的协同体系。自主研发的冻干试剂为化学成分明确限定、无血清、无动物源成分，可形成稳定的玻璃态基质，在冻干过程中紧密包裹外泌体，有效缓冲冰晶形成带来的机械应力及脱水损伤，牢牢锁住其生物活性。同步匹配精准可控的冻干曲线，在确保水分充分脱除的前提下，最大限度保留外泌体结构完整性，为外泌体的长效储运提供核心支撑。

外泌体冻干案例

(1）外泌体原液收获及预处理：

本案例采用MCM CulMsc-SFM31 Pro(A)培养P5代脐带来源的间充质干细胞，培养完成后，收集含外泌体的细胞培养上清液，通过0.45μm/0.22μm滤器过滤处理，去除其中的细胞碎片及各类杂质；

(2）超滤浓缩：

采用切向流超滤法现样品浓缩，并完成下游蛋白纯化工（850102）序。

(3）冻干：

取适量纯化后的外泌体溶液，与待测冻干保护试剂按等体积比例充分混匀，进行冻干处理。

(4）对冻干前后的外泌体指标开展评估：

①外观评估：冻干后产物呈纯白色圆柱形，质地饱满细腻，整体形态规整，无萎缩、无开裂现象；溶解性评估：形成的冻干粉溶解性优良，极易与水互溶（见图2）。

图 2. 外泌体冻干后外观

②回收率评估：纳米颗粒跟踪分析（NTA）检测显示，外泌体冻干回收率最高可达97%以上，且粒径分布集中，与冻干前差异微小，外泌体结构得到有效保护（见图3、4）。

图3. 纳米颗粒跟踪分析检测冻干后外泌体回收率

图4. 冻干前后外泌体粒径分布

结语

东富龙（300171）外泌体无血清冻干保护剂（ML1001-100）及其配套冻干工艺同高效培养工艺、三步递进纯化策略形成协同闭环，从源头产能提升、中间品质把控到终端储运保障，全方位破解外泌体产业化进程中的核心痛点。实现单支千亿级外泌体载量的突破，更印证了该试剂在规模化制备中的实用价值，为外泌体从实验室研究走向临床转化、医美应用等多元场景提供了可靠的工艺保障。未来，随着外泌体应用市场的快速扩容，东富龙（300171）这款专用冻干试剂将持续发挥技术壁垒优势，打破低温储运的行业桎梏，为外泌体技术的稳定落地与规模化普及注入核心动能，助力解锁更多生物医疗领域的创新可能。

关于东富龙

东富龙（300171）（股票代码300171）成立于1993年，2011年创业板上市，总部位于上海，是一家为全球制药公司提供工艺服务与耗材、核心装备及工程的整体解决方案服务商。东富龙（300171）秉承“天道酬勤”核心价值观，坚守“专业技术服务于生物医药”的使命，以“系统化、国际化、数智化”的发展战略，不断前行。

东富龙（300171）拥有四个核心事业部：工艺事业部、制剂装备事业部、工程事业部、食品工程事业部。迄今有东富龙（300171）生命科技、东富龙（300171）德惠等35家境内控股子公司，17家境外控股子公司，国内外共8个基础制造基地，拥有中国、美国、德国3个全球研发中心，东富龙（300171）持续加强药物制造科学和药机科学制造的研究，致力打造“下一代的药物制造平台”，为研发、中试及商业化生产的客户提供专业解决方案，助力药物快速研发及大规模商业化生产。