近年来全球多项I期临床数据证实，in vivo CAR-T疗法在血液肿瘤领域具备突出疗效与可控安全性，该技术已从基础概念验证阶段迈入临床转化的关键期。对比传统体外制备ex vivo CAR-T产品，in vivo CAR-T从底层机制上攻克了个体化制备流程复杂、生产周期（883436）漫长、制造成本高昂、患者细胞适配性差等产业化核心痛点，是当前CGT赛道产业化落地前景最广阔的下一代免疫细胞技术。
图1 体外与体内嵌合抗原受体(CAR)-T细胞技术概述*
针对in vivo CAR-T独特的技术特征、监管边界不清晰、非临床评价体系不统一、双路径申报差异大等行业痛点，昭衍新药（HK6127）搭建了覆盖药理药效研究、临床前生物分析、GLP毒理评价、IND注册申报、IIT临床研究服务、临床生物分析一站式服务体系，提供可落地、合规化的全套技术解决方案。
监管变革
In vivo CAR-T疗法直接向患者机体注射装载CAR基因的靶向递送载体（病毒/非病毒）制剂，入体后可特异性识别机体内源T细胞，在血管、淋巴等组织中实现扩增，最终靶向杀伤肿瘤细胞。跨越了传统“细胞治疗”的界限，将人体本身当作“生物反应器”，它兼具载体递送、体内基因修饰、活细胞免疫活化三重属性，产品监管归类具备特殊性。
随着2026年5月1日国务院818号令《生物医学新技术临床研究与临床转化应用管理条例》正式实施，以及7月3日，CDE发布的最新指导原则，《细胞治疗药品范围和归类技术指导原则（2026年版）》和《基因治疗药品范围和归类技术指导原则（2026年版）》。因此，从产品本质与监管分类上，统一按基因治疗进行管理，正式确立了“药品注册IND+医学新技术IIT研究/转化”双轨并行路径，为产品多元化临床转化打通政策通道。
昭衍综合行业研发实践，当前In vivo CAR-T管线推进过程中普遍面临几大核心瓶颈：专属配套生物分析方法学体系缺失、差异化GLP 毒理评价方案搭建难度高、基因治疗专项IND申报材料复杂、临床长期安全性随访体系搭建、818 号令要求的全流程溯源合规管理等。下文将围绕研发全流程关键模块，拆解各阶段核心评价要求、IND与IIT试验差异及合规实施要点。
In Vivo CAR-T药理药效学差异化评价
3.1
In Vivo CAR-T体外药效模型
体外药效研究是in vivo CAR-T候选药物进入体内评价前的重要评价环节，用于对药物的功能特性和初步安全性的筛选与表征。IND申报：通常依托人原代PBMC与肿瘤细胞共培养模型、患者来源肿瘤类器官（PDO）搭建评价平台，并辅以人原代细胞体系进行交叉验证。主要评价指标包括：载体转导效率与特异性、CAR特异性杀伤活性及T细胞活化水平、潜在脱靶毒性（如对非肿瘤相关细胞系或正常组织来源细胞的交叉反应性）、肿瘤微环境浸润能力、细胞因子释放水平（作为体内CRS风险的间接提示指标）、以及CAR-T细胞体外功能持久性等。IIT研究要求：现行监管框架下并无统一的IIT非临床数据要求，具体标准通常由项目所在机构伦理委员会审查确定。一般而言，需验证载体转导的有效性与特异性、CAR杀伤特异性及T细胞活化能力（采用二维肿瘤细胞共培养模型即可），并初步排除明显的脱靶风险，以为伦理审查提供基础的功能与安全性论证支持。
3.2
体内药效模型
体内药效研究核心用于支撑临床剂量选择、佐证疗效可靠性，两类路径的试验设计思路基本一致，只是在动物模型数量，组别数设置上略有差异。
IND试验设计服务于注册申报与临床桥接，通常采用人源化荷瘤模型（如PBMC或CD34+免疫重建模型），设置多个剂量组，分析肿瘤生长抑制率（TGI）及肿瘤消退/复发情况，构建剂量-反应关系，同时检测体内CAR-T细胞的扩增、分布及持久性（体内药代/药效学特征），为临床起始剂量与给药方案的确定提供量化依据。IIT临床研究路径：通常可采用单一荷瘤模型、设置有限的剂量梯度（如两个剂量组）进行初步药效探索，不强制要求构建完整的剂量-反应关系曲线，但仍需提供足以支持首次人体给药剂量合理性的基础数据。
昭衍新药（HK6127）可覆盖in vivo CAR-T全层级药效评价需求，可根据项目阶段灵活定制方案，早期实现高通（QCOM）量载体筛选与机制验证，注册阶段产出符合CDE审评要求的标准化药效数据，实现从早期研发到注册申报的无缝衔接。
In vivo CAR-T生物分析体系
生物分析是in vivo CAR-T研发与申报的核心技术壁垒与核查重点，in vivo CAR-T生物分析贯穿非临床GLP研究与全部临床阶段，涵盖载体定量与生物分布、细胞动力学、免疫原性、毒性相关生物标志物四大体系，根据载体类型不同，整体分析策略存在差异。
4.1
两大主流载体差异化生物分析策略
慢病毒LV载体系统：基因整合至宿主基因组实现CAR长期稳定表达，生物分析核心围绕病毒载体拷贝、CAR 基因整合、CAR-T 细胞功能、多重免疫原性（如抗VSVG、抗scFv、抗CAR抗体）、插入突变安全风险五大维度，依靠qPCR/ddPCR、流式FACS、ELISA/MSD、LAM-PCR+NGS 多平台联用，重点评估载体体内留存、脱靶转导、长期基因组整合毒性。
LNP-mRNA非病毒系统：仅瞬时表达CAR、无基因组插入风险，检测重心转向CAR mRNA体内递送效率、LNP 脂质体内暴露分布、靶向抗体药代、PEG/靶向抗体/CAR三重免疫原性，搭配RT-qPCR、LC-MS/MS脂质定量、流式细胞术完成PK/PD关联评价。
4.2
PK/TK试验IND与IIT不同
IND注册：药代动力学和组织分布研究是核心内容，毒代动力学（TK）/细胞动力学与GLP毒理试验紧密结合，在各采样时间点同步检测CAR基因拷贝数及CAR-T细胞的生成水平，建立CAR-T细胞与毒性的相关性分析；病毒载体脱落需开展全周期（883436）监测，对动物尿液、粪便等样本进行持续定量检测，全面评估病毒载体脱落与环境暴露风险。
IIT临床研究：可进行体内PK的分布检测，获得产品的组分在体内的初步药代动力学特征数据，以指导临床。
In Vivo CAR-T GLP毒理学评价
In vivo CAR-T毒理体系是区别于所有CGT产品的最大难点，兼具载体毒性、基因整合毒性、CAR-T免疫毒性等多重风险。
5.1
IND与IIT相同点
两种申报途径均需做以下试验：开展不同剂量水平的免疫系统人源化动物非GLP探索性研究，不同水平，获得初步的安全性数据，评估在靶毒性/脱靶毒性（on-target/off- target）；采用人体组织交叉反应和/或膜蛋白阵列试验进行脱靶评估；体外细胞因子释放试验提示潜在的细胞因子释放相关免疫毒性风险。
5.2
IND与IIT不同点
IND：需要根据产品的特性和临床拟用方案设计安全性试验，选择合适的相关动物开展安全性评价，免疫系统人源化动物类型的选择能够支持临床用药周期（883436）或者足够的观察周期（883436），以充分评估产品的安全性。试验中可以伴随开展安全药理相关指标的监测。当非人灵长类为相关动物种属，或CAR作用于全新靶点时，，建议开展相应的研究，以弥补人源化动物模型无法充分获取的的免疫相关的安全性信息。所有试验均需要符合GLP的规范。
此外，针对LNP的载体平台，如果有新的脂质成分，需要进行全面的安全性研究，包括两个种属的一般毒理研究、遗传毒性研究、安全药理研究等，也可以结合在in vivo CAR-T的毒理研究中伴随考察。。对于整合型载体，要求监测转染T细胞（靶细胞）的克隆扩增能力， 以及针对脱靶细胞整合位点进行分析评估。
IIT：需要了解产品的安全性信息，获得产品的脱靶风险评估数据，试验设计相对简化，但仍然需要获得能够指导临床的安全性数据， 安全性、有效性以及组织分布研究可以有有效的整合在一起评估。
In Vivo CAR-T临床监测与临床配套差异
IND注册临床以全周期（883436）合规风控、长期安全性可追溯为核心目标，整体监测体系严苛、周期（883436）长、指标全；IIT研究以临床探索+确证性临床研究为核心，可合理精简监测密度、随访周期（883436）与验证标准。
IND注册临床在治疗风险高发期设置密集多节点检测，强制开展CAR细胞动力学、载体拷贝数、全套细胞因子、脑脊液专项筛查，严控重度CRS/ICANS风险；远期需开展多年持续性基因整合监测、肿瘤风险筛查，搭建完整药物警戒体系，按期出具DSUR安全性报告，所有临床样本检测方法均需完成全套方法学验证，数据可用于NDA申报与药监核查。
IIT临床研究可按需精简检测指标与采样频次，仅保留核心疗效与安全监测项目，无需执行超长期标准化随访体系，样本归档与安全警戒流程可适配院内伦理备案要求简化实施。
从临床层面来看，昭衍可依据项目路径定制差异化临床配套方案。针对IND注册项目，可出具经完整方法学验证、可用于CDE申报的临床样本检测数据，搭建标准化药物警戒体系，完成长期样本留存、全周期（883436） ADA 与载体脱落监测，同步出具合规 DSUR 报告；面向IIT研究，能按需优化研究策略、精简检测指标、合理缩短随访监测周期（883436），简化样本归档与药物警戒流程，匹配伦理豁免要求。一站式覆盖样本分析、安全性随访、PV全流程，兼顾注册申报合规性与院内科研项目灵活需求。
昭衍新药（HK6127）具备国内完备的in vivo CAR-T一站式临床前评价能力，适配药品IND注册与IIT科研双路径。可开展GLP级3–6个月猴长期重复给药毒理、生殖、致瘤等高风险专项试验，配套人源化小鼠荷瘤模型完成药效、体内分布、CRS/ICANS毒性评估。具备中美欧日韩多国GLP资质，数据全球药监互认，qPCR、流式、多重病理等全套检测平台成熟。深耕细胞与基因治疗法规解读，既能产出完整合规数据支撑新药注册申报，也可按需优化方案满足IIT加速研发需求；同步配套CMC检定、临床样本分析与药物警戒咨询，全链条缩短研发周期（883436）。
